​​Мегалодон занимал очень высокий трофический уровень — исследователи выяснили это, проанализировав содержание стабильных изотопов азота в зубах мегалодона, других вымерших акул, а также современных видов. Максимальное значение изотопов азота у мегалодона было выше, чем у любых других исследованных видов акул — как вымерших, так и современных. Более того, оно было выше, чем у современных морских млекопитающих, таких как белый медведь и косатка. Такие высокие значения можно объяснить рационом мегалодонов: они могли охотиться на представителей своего вида, а также на детенышей млекопитающих, которые еще питались молоком.